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卵磷脂改善記憶的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
卵磷脂是人體細(xì)胞膜的組成部分, 參與人體代謝, 對(duì)人體有益。本研究旨在探討卵磷脂改善記憶的作用, 為開(kāi)發(fā)利用卵磷脂提供科學(xué)依據(jù)。
1 材 料 與 方 法
1. 1 動(dòng)物與分組
昆明種小鼠100只, 雌雄各半, 體重18~22g。將小鼠隨機(jī)分為4組: 對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)1組、2組和3組, 每組小鼠雌雄各半。實(shí)驗(yàn)1、2、3組小鼠按卵磷脂(家畜腦中提取精制而成)135. 0、405. 0和675. 0m gö(kgbw·d)的劑量連續(xù)灌胃30d后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)觀察, 對(duì)照組動(dòng)物灌胃等體積冷沸水。選擇跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn)與迷津?qū)嶒?yàn)作為觀察指標(biāo)。按實(shí)驗(yàn)方法的要求, 實(shí)驗(yàn)第1d進(jìn)行訓(xùn)練,24h后觀察動(dòng)物上述指標(biāo)的變化。
1. 2 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)
反應(yīng)箱底裝有銅柵, 其兩端連接36V電源。動(dòng)物受到電擊后的正常反應(yīng)是跳到箱內(nèi)的絕緣平臺(tái)上以免電擊。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上, 受到電擊后又迅速跳回平臺(tái), 如此訓(xùn)練5m in, 并記錄每只小鼠受電擊的次數(shù)(或稱(chēng)錯(cuò)誤次數(shù)), 作為其學(xué)習(xí)成績(jī)。24h或48h后重復(fù)測(cè)定, 即記憶保持測(cè)驗(yàn)。記錄受電擊的動(dòng)物數(shù)、**次跳下平臺(tái)的潛伏期和3m in內(nèi)的總錯(cuò)誤次數(shù)。
1. 3 避暗實(shí)驗(yàn)
利用小鼠嗜暗習(xí)性設(shè)計(jì)的裝置, 該裝置的一半是暗室、另一半是明室, 明暗室之間有一小洞相通。暗室底部裝有通電的銅柵, 并與自動(dòng)記錄潛伏期時(shí)間的計(jì)時(shí)器相連。小鼠進(jìn)入暗室即受到電擊, 計(jì)時(shí)自動(dòng)停止。末次給卵磷脂后次日開(kāi)始訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠背向洞口放入明室, 同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。動(dòng)物穿過(guò)洞口進(jìn)入暗室受到電擊, 計(jì)時(shí)器自動(dòng)停止, 實(shí)驗(yàn)終止, 取出小鼠。記錄每只鼠自放入明室至進(jìn)入暗室遭電擊的間隔時(shí)間, 即潛伏期。24h或48h后重復(fù)測(cè)
定, 記錄每只動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期和5m in內(nèi)遭電擊次數(shù), 同時(shí)記錄5m in內(nèi)進(jìn)入暗室(錯(cuò)誤反應(yīng))動(dòng)物的百分率。
1. 4 迷津?qū)嶒?yàn)
55cm×70cm×12cm 的箱體, 包括三個(gè)部分:放置動(dòng)物的起步區(qū), 放置食物的目標(biāo)區(qū)及跑道。跑道長(zhǎng)短不等, 有直行與轉(zhuǎn)彎, 至少有一個(gè)或幾個(gè)交叉口供動(dòng)物選擇到達(dá)目標(biāo)區(qū)的方向或路徑。實(shí)驗(yàn)前3d小鼠禁食, 使其產(chǎn)生攝取食物的驅(qū)動(dòng)力, 卵磷脂的使用同前。末次給予卵磷脂1h后開(kāi)始記憶訓(xùn)練, 將食物放在目標(biāo)區(qū), 讓動(dòng)物在跑道上熟悉環(huán)境, 訓(xùn)練5m in。24h或48h以后開(kāi)始實(shí)驗(yàn), 記錄動(dòng)物離開(kāi)起步區(qū)覓食時(shí)是否走回頭路, 記錄回頭(即錯(cuò)誤記憶的)的次數(shù)以及到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間, 觀察各組動(dòng)物的回頭次數(shù)和走出迷宮時(shí)間的差異。
2 結(jié) 果
2. 1 卵磷脂對(duì)小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響(表1)
結(jié)果表明, 各組小鼠進(jìn)入跳臺(tái)箱后, 其潛伏期有明顯差異: 對(duì)照組為53. 0s, 實(shí)驗(yàn)1、2、3組分別為95. 0s、101. 1s和66. 0s, 實(shí)驗(yàn)1、2兩組潛伏期均比對(duì)照組長(zhǎng)。小鼠受電擊次數(shù)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明, 實(shí)驗(yàn)1、2兩組分別為0. 9 和1. 0 次, 均明顯低于對(duì)照組(2. 0 次)。動(dòng)物不下跳臺(tái)即可免遭電擊, 對(duì)照組有3只小鼠不下跳臺(tái), 實(shí)驗(yàn)1、2、3組分別有9、9和5只小鼠不下跳臺(tái), 實(shí)驗(yàn)1、2組不下跳臺(tái)的動(dòng)物數(shù)均比對(duì)照組多(P< 0. 05)。 卵磷脂的用量為135. 0~
405. 0m gö(kgbw·d)可明顯增強(qiáng)小鼠的記憶力。2. 2 卵磷脂對(duì)小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的影響(表2)
結(jié)果表明, 小鼠進(jìn)入避暗箱后有嗜暗特性, 4 個(gè)組的潛伏期都超過(guò)2m in, 無(wú)明顯差別。但從進(jìn)暗箱的次數(shù)看, 三個(gè)實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組均明顯減少。小鼠不進(jìn)暗箱表明其嗜暗習(xí)性發(fā)生變化。從表2可見(jiàn), 在全程5m in的實(shí)驗(yàn)中, 對(duì)照組1只小鼠不進(jìn)暗箱, 實(shí)驗(yàn)1、2、3組分別有8、7、4只小鼠不進(jìn)暗箱, 三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均有顯著差異。提示使用卵磷脂后, 實(shí)驗(yàn)
組小鼠對(duì)前**的訓(xùn)練(進(jìn)入暗箱就會(huì)遭到電擊)有了記憶, 表明卵磷脂可改善小鼠腦功能, 提高記憶力。
2. 3 卵磷脂對(duì)小鼠迷津?qū)嶒?yàn)的影響(表3)
結(jié)果表明, 對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的回頭次數(shù)分別為1. 3、0. 8、0. 6 和0. 5 次, 實(shí)驗(yàn)2、3組小鼠回頭次數(shù)明顯少于對(duì)照組, 其小鼠一走進(jìn)迷宮, 很快就走向終點(diǎn)。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的小鼠中, 分別有9、14、17和20只小鼠沒(méi)回頭就向終點(diǎn)走去。分別占各組小鼠總數(shù)的36%、56%、68%和80% ,實(shí)驗(yàn)3組與對(duì)照組有顯著差異, 對(duì)照組小鼠走出迷宮時(shí)間為83. 1s, 實(shí)驗(yàn)
1、2、3組分別為53. 0s、46. 0s、45. 0s。盡管各組之間無(wú)顯著性差異, 但提示使用卵磷脂后小鼠走出迷宮時(shí)間有降低的趨勢(shì)。上述結(jié)果表明, 實(shí)驗(yàn)組小鼠對(duì)前**的訓(xùn)練有了記憶, 提示卵磷脂可改善小鼠腦功能, 提高記憶力。
3 討論
卵磷脂是生物膜脂質(zhì)中的主要組成成分, 具有增強(qiáng)神經(jīng)功能、調(diào)節(jié)**神經(jīng)活動(dòng)的作用
, 因此有利于消除疲勞、增強(qiáng)記憶、提高學(xué)習(xí)能力。本實(shí)驗(yàn)觀察證實(shí)卵磷脂有增強(qiáng)記憶的功能, 為卵磷脂開(kāi)發(fā)利用提供了有利的支持。據(jù)美國(guó)食品與**管理局(FDA)、世界衛(wèi)生組織(W HO)專(zhuān)家委員會(huì)報(bào)告, 每日服用卵磷脂22~38g, 經(jīng)過(guò)2~4m, 無(wú)任何**影響。實(shí)驗(yàn)3組不如實(shí)驗(yàn)1、2組有效, 從以往的實(shí)驗(yàn)中也觀察到此現(xiàn)象, 它提示使用卵磷脂的劑量并不是越多越好, 具體原因待今后的實(shí)驗(yàn)中證明, 我們推薦人日服卵磷脂以2. 0~4. 5 g為宜。