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構菌菌絲酒提物的藥效學研究

日期:2025-04-30 19:36
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摘要:

構菌菌絲酒提物的藥效學研究
 
 摘要: 用東莨菪堿造成小鼠記憶獲得障礙或用亞硝酸鈉破壞小鼠記憶鞏固, 用明暗箱法來觀察菌絲酒提物對小鼠學習記憶障礙的改善作用; 用斷頭喘息法觀察菌絲酒提物的抗氧化作用; 用游泳法觀察菌絲酒提物的抗疲勞作用。結果顯示, 小鼠灌胃菌絲酒提物能明顯延長避暗實驗中記憶障礙小鼠從明場進入暗場的潛伏期, 減少錯誤次數(shù); 能顯著延長小鼠斷頭喘息時間和小鼠在冷水中的游泳時間。說明菌絲酒提物具有較強的改善小鼠學習記憶障礙、抗氧化作用和抗疲勞作用。
關鍵詞: 菌絲酒提物; 學習記憶; 抗氧化; 抗疲勞
食用菌 , 素有“素中之葷”的美稱 , 不僅有很高的營養(yǎng)價值 , 而且還有很高的藥用價值[1 ]。構菌是藥食兩用菌 , 俗稱增智菇。我所生物合成室多年來在對多種構菌菌株進行篩選的基礎上優(yōu)選出的具有高產(chǎn)和顯著生物活性的菌株 , 我所植化室對發(fā)酵物進行了分離提取 , 我們對其中的一個提取物 - 菌絲酒提物進行了一系列的藥效學研究 , 以開發(fā)其藥用價值。
1  材料
111 動物  ICR小鼠 , 18 - 22g , 雄性。
112 菌絲酒提物的制備  發(fā)酵菌絲用 70 %乙醇提取 , 得到菌絲酒提物。臨用前用生理鹽水 (NS) 配制成濃度為 (小) 015g/ kg、 (中) 1g/ kg、 (大)115g/ kg三個濃度。按011ml/ 10g體重給藥。
113 試劑及儀器  氫溴酸東莨菪堿; 亞硝酸鈉 (NaNO2); 多萘哌齊 (DO) 。明 暗 箱。
2  方法與結果
211  菌絲酒提物對東莨宕堿致小鼠學習記憶障礙的影響  ICR小鼠 60 只 , 體重 18 - 22g , 雄性 , 實驗前在本實驗室飼養(yǎng)兩天以適應環(huán)境。實驗時隨機分為6組 , 每組10只。設正常對照組 (NS) 、模型對照組、菌絲酒提物 015g/ kg 組、菌絲酒提物 1g/kg組、菌絲酒提物115g/ kg組和陽**對照組 (多萘哌齊3mg/ kg) , 均灌胃給藥。**天下午給受試**一次 , **天學習前先給受試** , 30min 后除正常對照組外 , 每組小鼠腹腔注射東莨菪堿1mg/ kg , 30min后將小鼠放進明暗箱中先適應環(huán)境3min , 然后給定電壓為 36V , 進行學習 5min , 下午再給一次藥。第三天先給一次藥 , 30min 后進行記憶測試 , 記錄小鼠**次進入暗箱的潛伏期及5min內(nèi)進入暗箱的次數(shù) (或稱錯誤次數(shù)) 。結果見表1。模型組與正常對照組比 , 小鼠**次進入暗場的潛伏期明顯縮短 ( P < 01001) , 錯誤次數(shù)明顯增多 (P < 0101) , 給藥組與模型組相比 , 菌絲酒提物015g/ kg、1g/ kg、115g/ kg劑量組均能明顯延長小鼠**次進入暗場的潛伏期 , 呈量效關系 , 1g/ kg和115g/ kg劑量組能明顯減少錯誤次數(shù) (P < 0105) 。由小鼠**次進入暗場的潛伏期結果計算得到菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg劑量組對小鼠學習記憶的改善率分別為5915 %、7918 %和9116 %。
 
 
212  對亞硝酸鈉造成小鼠記憶鞏固障礙的影響  
分組、給藥同 211 項 , **天學習前先給受試** , 30min后除正常對照組外 , 每組小鼠皮下注射亞硝酸鈉120mg/ kg , 30min后將小鼠放進明暗箱中學習 , 24h后進行記憶測試。結果見表 2。與模型組相比 , 菌絲酒提物 1g/ kg和 115g/ kg劑量組均能明顯延長小鼠**次進入暗場的潛伏期 (P < 0105和 P < 0101) , 115g/ kg劑量組與多萘哌齊組小鼠**次進入暗箱的潛伏期都超過了正常對照組。1g/kg和 115g/ kg 劑量組能明顯減少錯誤次數(shù) ( P <0105) 。菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg劑量組小鼠的記憶改善率分別為 5614 %、7713 %和11618 %。
 
213 對小鼠斷頭喘息的影響  ICR小鼠 40 只 , 體重18~22g , 雄性 , 隨機分為 4 組 , 每組 10 只。設正常對照 NS組、菌絲酒提物 015g/ kg 組、菌絲酒提物1g/ kg組和菌絲酒提物 115g/ kg組 , 均皮下注射給藥。小鼠皮下注射** 30min后 , 用剪刀迅速剪下小鼠頭部 , 立即計時 , 記錄小鼠頭部脫離身體后張口喘息的時間。結果見表 3。小鼠被斷頭后菌絲酒提物組 1g/ kg 和 115g/ kg 與正常對照組比較 ,其喘息時間分別延長了4118 %和7217 % , 均有統(tǒng)計學差異 (P < 01001) 。菌絲酒提物 015g/ kg與正常對照組相比其喘息時間延長了 612 % , 具有統(tǒng)計學差異 (P < 0105) 。
 
214 抗疲勞作用  分組、給藥同 213 項 , 灌胃給藥。桶中放入19cm深的水 , 再用冰調(diào)節(jié)水溫度至19℃。給藥 30min 后 , 觀察其在水中的游泳 (存活) 時間。結果見表 4。灌胃菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和115g/ kg 與正常對照組比較 , 游泳時間分別延長了3215 %、6419 %和9714 % , 均具有統(tǒng)計學差異 (P < 0105) 。
 
3  討論
回避性條件反射方法已得到廣泛應用, 但正常動物經(jīng)一次訓練即可學會逃避電擊, 且很快趨于鞏固,維持相當一段時間。在這種情況下觀察**增強正常動物記憶的作用是困難的。采用記憶缺失的動物模型, 觀察**改善動物記憶障礙的作用, 不但有助于評定**的作用, 且可初步分析**的作用機制[2]。東莨菪堿造成小鼠記憶獲得障礙和亞硝酸鈉造成小鼠記憶鞏固障礙是國內(nèi)外經(jīng)常使用的較為成熟的模型,避暗法也是研究學習記憶的經(jīng)典實驗方法。**影響記憶可能有兩種形式: ①**改變一般機能狀態(tài)而影響記憶; ②**作用于與記憶有關的神經(jīng)結構, 易化記憶過程[3]。已有研究表明, 東莨菪堿是M- 膽堿能受體阻滯劑, 亞硝酸鈉是致腦缺氧劑。膽堿能路徑是記憶的內(nèi)在基礎, 腦部缺氧可破壞記憶的保持[4]。因此我們采用上述模型來觀察菌絲酒提物對小鼠學習記憶的作用。本研究結果提示, 菌絲酒提物015~115g/ kg對東莨菪堿造成的記憶獲得障礙及亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙都有較明顯的改善作用,且此作用有量效關系。劑量越大, 作用越明顯。說明菌絲酒提物可能具有膽堿能樣作用, 尚需進一步的實驗證明。斷頭喘息實驗結果提示, 菌絲酒提物可促進需氧代謝, 改善腦缺氧, 為菌絲酒提物可改善亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙提供了一個理論依據(jù); 游泳實驗結果提示, 菌絲酒提物有抗疲勞和抗寒冷作用, 其作用機制正在研究中。

滬公網(wǎng)安備 31011202007349號